生姜中涕灭威及其代谢物检测的固相萃取方法

生姜中涕灭威及其代谢物检测的固相萃取方法（Clover®NH2）

《SN/T 2441-2010 进出口食品中涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》

一、样品提取
称取经粉碎的 5.00 g 生姜试样 ( 精确至 0.01 g) 于 50 mL离心管中，加入 20 mL 乙腈，均质 2 min，振荡提取 20min，上清液过无水硫酸钠收集到分液漏斗中，残渣再加入20 mL 乙腈，重复上述操作一次，合并 2 次滤液，加入 20mL 用乙腈饱和的正己烷，振荡 10 min，静置分层，弃去正己烷层，乙腈层于40 ℃下旋转蒸发浓缩至干，用2 mL甲醇-二氯甲烷 (1:99, v/v) 溶解，待净化。

二、SPE 柱净化（Clover® NH2，500 mg/3 mL）
(1) 活化：加入 5 mL 甲醇 - 二氯甲烷 (1:99, v/v) 活化，弃去流出液。
(2) 上样：加入待净化液，流速控制在 1 mL/min 内，收集流出液。
(3) 洗脱：用 5 mL 甲醇 - 二氯甲烷 (1:99, v/v) 洗脱，接收流出液，并重复一次，合并步骤 (2)、(3) 流出液。
(4) 浓缩定容：40℃缓慢氮气流条件下吹至近干 ( 约 0.5 mL)后挥干，用 1.0 mL 乙腈 -0.1% 甲酸水溶液 (10:90, v/v) 定容至 1 mL，过 0.45 µm 微孔滤膜，上 LC-MS/MS 测定。
三、仪器条件
质谱仪：API 4000
色谱柱：Venusil ASB C18 (2.1 mm×150 mm, 5 µm)
流动相：A：乙腈 B：0.05 % 甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 流动相梯度洗脱程序

流速：0.3 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：5 µL
离子源：电喷雾 (ESI)
扫描模式：正离子
检测方式：多反应监测 (MRM)
表 2 质谱仪离子源参数

表 3 涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜的母离子和子离子参数表

表 4 10.0 µg/kg 生姜中涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜的添加回收结果