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详解黄曲霉毒素亲和柱的分析步骤

发布时间:2022-05-26      点击次数:68
  黄曲霉毒素亲和柱能够特异性的纯化与浓缩样品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。黄曲霉毒素免疫亲和柱广泛地应用于粮食、食品、饲料、坚果、花生、酱油、醋、辣椒、胡椒、药材和酒类等样品的提取,该方法速度快、操作简单、准确性高,对准确灵敏的测定样品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2起到十分重要的作用。
 
  原理:样品经甲醇+水提取液提取、过滤、稀释,然后通过键合有黄曲霉毒素特殊抗体的免疫亲和柱。此时,黄曲霉毒素被亲和柱中的抗体特异性的吸附,用水或缓冲液将免疫亲和柱上的杂质除去,然后用甲醇使抗体变性,从而将黄曲霉毒素从亲和柱上洗脱下来。用HPLC或荧光计进行定量检测。
 
  黄曲霉毒素亲和柱分析步骤:
  1.样品提取及稀释:
  大米、玉米、小麦、坚果、调料、花生及其制品:准确称取试样25.0g于250mL具塞锥形瓶中,加入5.0g氯化钠及准确加入125.0mL甲醇-水(7+3),以均质器高速搅拌提取2min。槽纹滤纸过滤,准确移取15.0mL滤液并加入30.0mL水稀释,用玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
  植物油脂:准确称取试样25.0g于250mL具塞锥形瓶中,加入5.0g氯化钠及入125.0mL甲醇-水(7+3),以均质器高速搅拌提取2min。槽纹滤纸过滤,准确移取15.0mL滤液并加入30.0mL水稀释,用玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
  酱油:称取试样50.0g于250.0mL具塞锥形瓶中,加入2.5g氯化钠及加入甲醇-水(8+2)至100.0mL,以均质器高速搅拌提取1min。槽纹滤纸过滤,准确移取10.0mL滤液并加入40.0mL水稀释,用玻璃纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。
  2.样品的净化
  黄曲霉毒素总量免疫亲和柱的柱容量(吸附黄曲霉毒素量)为300ng,当样品中黄曲霉毒素超过测定范围时,请适当减小上柱体积,使其在检测范围内,计算出含量。
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