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呕吐毒素酶联免疫试剂盒检测原理及注意事项?

发布时间:2022-07-25      点击次数:29

 呕吐毒素酶联免疫试剂盒检测原理及注意事项?

原理

测定的基础是抗原-抗体反应。微孔板上包被有抗抗体。加入呕吐毒素(DON)标准品或样品、酶标抗原和抗体后,游离的呕吐毒素与酶标抗原竞争结合抗体,抗体或抗体结合物与固定在微孔板上的抗抗体再结合,没有结合的标准品、酶标抗原及抗体被洗去,加入TMB底物显蓝色,加入终止液后颜色由蓝变黄,用酶标仪在450nm处检测,吸光值与样品中呕吐毒素含量成负相关,与标准曲线比较即可得出呕吐毒素的含量。

 

注意事项

  1. 室温低于20或试剂及样品未回到室温(20- 25)会导致数值偏低。

  2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。

  3. 标准物质和显色液对光敏感,避免直接暴露在光线下。

  4. 混合要均匀,洗板要彻底(包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀)。

  5. 终止液为强酸性物质,避免接触皮肤。

  6. 不要使用过了有效期的试剂盒,也不要混合使用不同批次的试剂盒,这样会引起测定结果不准确。

  7. 试剂盒的储存条件是2-8,切勿冷冻。

 

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