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做好这几点,轻松解决酶联免疫试剂盒常见问题

发布时间:2022-07-12      点击次数:94

Clover®酶联免疫试剂盒预实验的必要性,通过预实验可以熟悉整个实验的流程,发现可能忽略的问题;可以测试样本和试剂盒是否匹配,一旦出现不匹配的情况,不至于浪费过多样本;可以对样品中目的分析物的浓度作一下大致参考,以确定合适稀释度。

  一、Clover®酶联免疫试剂盒使用注意事项:

  1. 室温低于20或试剂及样品未回到室温(20- 25)会导致数值偏低。

  2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。

  3. 标准物质和显色液对光敏感,避免直接暴露在光线下。

  4. 混合要均匀,洗板要彻底(包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀)。

  5. 终止液为强酸性物质,避免接触皮肤。

  6. 不要使用过了有效期的试剂盒,也不要混合使用不同批次的试剂盒,这样会引起测定结果不准确。

  7. 试剂盒的储存条件是2-8,切勿冷冻。

      二、剩余试剂的妥善保存:

    酶联免疫试剂盒恢复至室温后,取出要使用的酶标板孔,未使用的酶标板孔应及时放回铝箔袋,加入干燥剂,封紧封口,冷藏保存。

    试剂盒常用检测方法简介

    ELISA试剂盒一般适合样品检测量大,实验室中常用于初筛的检测方法。若检测到阳性样本,再用确认方法做准确定量。

    试剂盒检测方法及优点介绍:

    A、间接法:此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。

    优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析,不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。

    B、直接法:将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。

    优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。

    C、双抗体夹心法:被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体,另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量,或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量,这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。

 

 

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