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iElisa 克伦特罗抗生素类检测试剂盒

简要描述:iElisa 克伦特罗抗生素类检测试剂盒
本试剂盒是利用竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被抗克伦特罗抗原。检测时,加入标准品或样品溶液,克伦特罗抗体及酶标记物,包被抗原和加入样本中的克伦特罗竞争性地与克伦特罗抗体结合后,再与酶标记物形成抗原抗体复合物,用TMB底物显色;

  • 产品型号:CE2012,96T
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-07-12
  • 访  问  量:777

详细介绍

品牌clover/科乐福货号CE2012
规格96T供货周期现货
应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

 iElisa 克伦特罗抗生素类检测试剂盒

iElisa 克伦特罗抗生素类检测试剂盒

 

iElisa克伦特罗检测试剂盒

(C/N: CE2012-G) 

---北京中检维康生物技术有限公司

 

1、检测原理

本试剂盒是利用竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被抗克伦特罗抗原。检测时,加入标准品或样品溶液,克伦特罗抗体及酶标记物,包被抗原和加入样本中的克伦特罗竞争性地与克伦特罗抗体结合后,再与酶标记物形成抗原抗体复合物,用TMB底物显色;加入反应终止液,在450nm波长酶标仪下进行检测,样品中的克伦特罗浓度与吸收光强度成反比。

2、检测范围

本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较,能经济、快速地检测出尿样、肌肉、肝脏及饲料等中的克伦特罗。

与类似物的交叉反应率:

克伦特罗&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;100%

特布他林&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7%

沙丁胺醇&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;25%

盐酸肾上腺素&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

去甲肾上腺素&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

莱克多巴胺&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

多巴酚丁胺&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

3、试剂盒组成

  1. 酶标板1块,96/
  2. 标准液6瓶(1mL/瓶):

0 ppb0.2ppb0.6ppb1.8ppb5.4ppb16.2ppb

  1. 抗体工作液 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;9mL
  2. 酶标记物 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;3mL
  3. 底物液A &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  4. 底物液B &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  5. 终止液   &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  6. 说明书 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;1

4、需要但试剂盒中不提供的器材和试剂

1)设备

  1. 微孔板酶标仪(450nm)
  2. 振荡器
  3. 离心机
  4. 微量移液器:20μL200μL,100μL~1000μL
  5. 容量瓶:100mL500mL1000mL

2)试剂

  1. 氢氧化钠、浓盐酸、乙酸乙酯、乙腈

5溶液的配制

样本前处理需配制

  1. 配液10.1M盐酸溶液

量取0.86mL浓盐酸加去离子水混匀定容至100mL

  1. 配液21M盐酸溶液

量取8.6mL浓盐酸加去离子水混匀定容至100mL

  1. 配液30.1M氢氧化钠溶液(组织样本)

0.4gNaOH加去离子水混匀溶解,定容至100mL

  1. 配液41M氢氧化钠溶液(饲料样本)

4.0gNaOH加去离子水混匀溶解,定容至100mL

  1. 配液5:乙腈-0.1M盐酸(组织样本)

乙腈与0.1M盐酸溶液按体积比84:16混匀

6样本前处理方法

样本处理前须知

处理任何样本时,都须注意:

  1. 实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
  2. 实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁净实验器具,以避免污染干扰实验结果。

样本处理步骤

尿样

  1. 尿样(若浑浊可以4000/ 离心5分钟,取清亮部分),20μL进行分析。
  2. 不用时应冷冻保存。

稀释倍数为1

畜禽组织(鸡、鸭、猪肌肉/肝脏等)

  1. 称取2±0.05 g匀浆的样品于50mL离心管中,加入6mL乙腈-0.1M盐酸,振荡5分钟;室温4000/分以上离心10分钟;
  2. 取上清3mL,加2mL 0.1M氢氧化钠溶液,6mL乙酸乙酯,振荡5分钟;室温4000/分,以上离心10分钟;
  3. 取全部上清至干净玻璃试管中,于56℃水浴下氮气/空气吹干;
  4. 1mL去离子水复溶,振荡30秒。
  5. 20μL进行分析。

稀释倍数为1

饲料

  1. 用食品粉碎机或乳钵研碎饲料样品,称5±0.05 g研碎的饲料样品,加10mL乙腈;用振荡器剧烈震荡5分钟,室温3000/分离心5分钟;
  2. 3mL上层清亮有机相至10mL干净的玻璃试管中,于50-60℃氮气流下吹干。
  3. 加入1mL正己烷,用涡旋仪涡旋30秒;再加入1mL去离子岁混合,用涡旋仪涡旋1分钟,3000/分离心5分钟;去除上层正己烷相。
  4. 取下层20μL进行分析。

稀释倍数为1

7酶联免疫检测步骤

测定前须知:

  1. 使用之前将所有试剂和需用微孔板回升至室温。
  2. 使用之后立即将所有试剂放回2-8℃
  3. 在使用中不要让微孔干燥。
  4. ELISA分析中的重复性,很大程度上取决于洗板的一致性,正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。
  5. 在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用该板膜盖住微孔板。

测定步骤:

  1. 将所需试剂从冷藏环境中取出,在室温下平衡30分钟,每种液体使用前均须摇匀。注意标准液均需做2个平行试验。
  2. 加标准液或样品液20μL到相应的微孔中,然后加20μL酶标记物,80μL抗体工作液,用膜盖好,25℃下避光反应30分钟。
  3. 洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,加去离子水 250mL/孔,每次浸泡15~30秒,充分洗涤4~5次,用吸水纸拍干。
  4. 显色:每孔先各加入底物液A 50μL,再各加入底物液B 50μL,轻轻晃荡混匀,并在25℃下避光反应15分钟。
  5. 读数:每孔各加50μL终止液,在酶标仪于450nm处测定OD值(建议用450/630nm双波长检测,在5分钟内读完数据)。

8结果分析    

所测得的标准液或样品吸光度的平均值(B)除以di一个标准液(0标准液)的吸光度(B<苏b>0)值再乘以100%,得到百分吸光度值。

百分吸光度值(%)=B/B<苏b>0 ×100%

        以标准品浓度的10为底的对数为X轴, 百分吸光值为Y轴,绘制标准曲线。将样本的百分吸光值代入标准曲线,从标准曲线上读出样本所对应的值,作为10的幂,乘以稀释倍数,即为样品中所含克伦特罗的量。利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样品的准确、快速分析。/

9试剂盒灵敏度、准确度、精密度

试剂盒灵敏度0.1ppb

样本低检测限:

尿样&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.2ppb

组织&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.4ppb

饲料 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.4ppb

回收率:

尿样  &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;90±10%

组织&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;85±10%

饲料  &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;80±15%

精密度

 试剂盒的变异系数均小于10%

10、注意事项

  1. 室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20-25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
  2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
  3. 反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。如不慎滴漏到皮肤上,请尽快用水冲洗。
  4. 不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
  5. 保存试剂盒于2-8℃,不要冷冻,将不用的微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
  6. 显色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450nm)值小于0.5A450nm<0.5 )时,表示试剂可能变质。
  7. 在加入底物液后,一般显色15分钟即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20分钟(或更长),但不得超过30分钟。反之,则减短反应时间。
  8. 该试剂盒佳反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

11、贮藏条件及保存期

贮藏条件:在28℃保存试剂盒

保存期:本试剂盒有效期为12个月。

 

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